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Principios generales para realizar pruebas sanguíneas

La sangre es la muestra utilizada con más frecuencia para las pruebas analíticas y, como corre a través de todo el cuerpo, se ve afectada por muchas condiciones médicas. la extracción de sangre proporciona una manera relativamente no invasiva de acceder a los glóbulos rojos y blancos, así como también a las enzimas, lípidos, factores de coagulación, hormonas y niveles de anticuerpos.

30 de Junio de 2011: Por Cheryl Stockman, Joyce S. Knoll

Preparación para la recolección de la muestra

Antes de la flebotomía misma, se deberían recolectar los insumos necesarios, como tubos apropiados para las pruebas ordenadas, desinfectante cutáneo y formularios de pedido de laboratorio. Para las pruebas poco comunes, es necesario hacer una investigación previa para determinar los tubos de sangre correctos y los requisitos de manipulación de la muestra. Muchos laboratorios de referencia proporcionan un manual con pautas de recolección y almacenamiento, pero si la información acerca de una prueba en particular no está disponible, contáctese con un representante de servicio al cliente para obtener instrucciones específicas. No suponga que los requisitos para toma y manipulación de las muestras son similares entre distintos laboratorios. Dos laboratorios pueden ofrecer la misma prueba, pero usar distintas metodologías con diferentes requisitos para las muestras. no está de más repetir que si se entrega la muestra correcta la primera vez, se aseguran resultados precisos y se evitan la frustración y la demora de tener que realizar una segunda venipunción al paciente.

Aunque pueda parecer obvio, es importante sacar sangre del paciente correcto, y se recomienda que el procedimiento operacional estándar del hospital incluya algún sistema para confirmar la identidad del paciente (por ej., banda en el cuello o simplemente un doble control con el dueño antes de devolver al animal al cuarto). Para contribuir aun más a la identificación del paciente, también se recomienda el uso de un número de identificación único de paciente y dueño. Muchas administraciones clínicas o sistemas de registros médicos ofrecen este servicio. Este número de registro médico debe vincularse con la identificación del paciente en cada nivel de actuación. Es probable que haya un momento en el cual se le esté haciendo pruebas sanguíneas a más de un Max o Smith.

De acuerdo con la prueba, podría ser necesario seguir procedimientos especiales, ya sea antes o después de la toma de muestras, que podrían requerir planificación anticipada. Por ejemplo, los cultivos sanguíneos requieren procedimientos de aseo particulares previos a la flebotomía, para disminuir el riesgo de contaminación de la muestra con flora cutánea. El ayuno del paciente se recomienda o exige en una cantidad de pruebas. Algunas pruebas requieren que las muestras se separen rápido de los glóbulos rojos o se coloquen de inmediato en hielo o se congelen, mientras que otras se ven afectadas en forma negativa por el contacto con vidrio o el tapón de goma de los tubos. Muchos procedimientos de prueba famacológicos no deberían realizarse sobre suero obtenido de tubos con gel separador de suero, porque se ha comprobado que el gel interfiere con la recuperación precisa del medicamento. la lista de requisitos específicos de las pruebas es extensa y peculiar, pero estos pocos ejemplos refuerzan la necesidad de comprender cada procedimiento de prueba, antes de la flebotomía.

Tubos de recolección

Es fundamental que se seleccionen los tubos indicados para las muestras de sangre necesarias para la prueba. Para cualquier prueba que incluya recuento celular o aislamiento de glóbulos blancos y su ADn se necesita sangre anticoagulada. El plasma proviene también de esos tubos y es la muestra requerida para algunas pruebas (por ej., pruebas que evalúan las proteínas de coagulación, que se consumirán en la reacción de coagulación). El suero proviene de la sangre entera a la cual se le ha permitido coagular.

En la tabla 1 se enumeran los tubos de recolección de sangre utilizados con más frecuencia, junto con sus usos más comunes y notas especiales. Esta lista de tubos de recolección no incluye tubos de especialidad para pruebas realizadas en forma menos habitual. Cuando una muestra debe recolectarse en varios tipos diferentes de tubos de recolección, siga las pautas universales teniendo en cuenta el orden en que los tubos deben llenarse. A medida que la jeringa de recolección se introduce en cada tubo sucesivo, existe la posibilidad de llevar remanente de anticoagulante hacia el siguiente tubo. Para minimizar este riesgo, los tubos deben llenarse en el siguiente orden:

1 Tubos de cultivo sanguíneo: se debe mantener la esterilidad durante la recolección de la muestra.

2 Tubos libres de anticoagulante (tubo simple de tapón rojo y tubos con separador de suero): el remanente de anticoagulante, en especial EDTA, pone en riesgo la quelación y disminuye de manera falsa la recuperación de calcio y magnesio en suero. El potasio en el anticoagulante EDTA eleva en forma falsa el valor de potasio informado.

3 Tubos de coagulación (citrato de sodio): éstos se llenan después de los tubos sin anticoagulante, para disminuir la contaminación de la muestra con tromboplastina tisular, que podría liberarse durante el trauma de la venipunción y elevar en forma falsa los tiempos de coagulación.

4 Heparina.

5 Tubos con EDTA.

6 Tubos con oxalato-fluoruro.

Una forma alternativa de evitar la contaminación de una aguja dispensadora común es llenar el tubo con EDTA, y luego remplazar la aguja de extracción por una nueva para llenar el resto de los tubos. El llenado de lostubos de sangre con una aguja y una jeringa debe hacerse con cuidado. Si la persona que realiza la flebotomía opta por llenar los tubos perforando la tapa de éstos con la aguja, se debe permitir que el vacío en el tubo tome la cantidad correcta de sangre desde la jeringa sin presionar el émbolo de ésta. llenar demasiado y, por lo tanto, sobrepasar al anticoagulante puede causar subsiguiente coagulación no deseada de la muestra sanguínea. Además, la presión extra ejercida sobre la muestra de sangre, cuando se la fuerza hacia atrás a través de la aguja, puede producir hemólisis, y esto resulta indeseable para la mayoría de los procedimientos de prueba.

El llenado insuficiente de los tubos que contienen anticoagulantes también puede resultar en una cantidad de artefactos para las muestras. El exceso de EDTA (tubo < 1/4 lleno) puede causar distorsión de glóbulos rojos y alteración de los índices eritrocitarios (vCM y CHCM), y puede elevar las mediciones de proteínas determinas por refractómetro. La cantidad excesiva de anticoagulante en un tubo de citrato que no está totalmente lleno puede diluir los factores de coagulación, prolongando en forma falsa los tiempos de coagulación.

Manipulación y almacenamiento de la muestra

Es fundamental seguir cualquier requisito de manipulación especial antes de enviar una muestra al laboratorio de referencia para las pruebas. Si la prueba exige suero o plasma, la muestra debería centrifugarse durante 10-15 minutos a aproximadamente 1300-1800 g. las RPM de centrifugación difieren de acuerdo con el tamaño del rotor centrífugo (largo del brazo del rotor). Pueden verse algunos artefactos si se demora la centrifugación, porque las células sanguíneas metabolizarán analitos, como glucosa y ciertas hormonas, y disminuirán en forma artificial sus niveles en la muestra. Según la prueba, el suero en los tubos simples de tapón rojo y algunas muestras de plasma (por ej., en anticoagulante EDTA, citrato o heparina) podrían necesitar ser transferidos a un tubo limpio libre de anticoagulante lejos de los glóbulos rojos. Utilice tubos de polipropileno para el suero que no pueda conservarse en tubos de vidrio. Cuando se utiliza un tubo con separador de suero, primero invierta delicadamente el tubo lleno varias veces, para mezclar la sangre con el activador de coagulación. Permita que las muestras en los tubos con separador de suero y los tubos simples de tapón rojo coagulen durante 20-30 minutos, preferentemente mientras están en sentido vertical, antes de la centrifugación. Si la muestra se centrifuga antes de completar la formación y retracción del coágulo, el suero puede quedar atrapado en un coágulo gelatinoso de fibrina. Aunque el suero puede aún ser liberado al comprimir el coágulo, el contenido de suero se verá disminuido de manera inevitable. la centrifugación exitosa de un tubo con separador de suero resultará en una barrera de gel que separa el suero del coágulo. En general, el suero de estos tubos no necesita transferirse a un tubo de transporte, a menos que vaya a almacenarse congelado. Si es necesario, las muestras pueden protegerse de la luz envolviéndolas en una hoja de aluminio. Si el espécimen será congelado, evite la repetición de ciclos de congelamiento-descongelamiento, que podrían causar degradación de la muestra. lo mejor es que las muestras se almacenen en un congelador que no se descongele en forma automática.

Envío de muestras con el mensajero del laboratorio

Es importante asegurarse de que las muestras de sangre que deben ser retiradas por un mensajero estén empaquetadas en forma correcta para el envío. Cada muestra necesita ser mantenida a la temperatura correcta durante todo su viaje. Aunque el mensajero debería tener una conservadora, las muestras pueden quedar expuestas a un largo período de almacenamiento en una conservadora que se abrirá y cerrará muchas veces antes de llegar al laboratorio. Las muestras congeladas pueden necesitar ser colocadas entre dos paquetes de hielo o, si se lo notifica de antemano, se puede pedir que el mensajero traiga hielo seco. Como alternativa, la sangre entera para los recuentos celulares no debería colocarse en forma directa contra un paquete de hielo, porque las células experimentarán lisis si la muestra se congela. Mantenga los frotis sanguíneos preparados fuera de la bolsa de hielo y nunca coloque los portaobjetos con los tubos de sangre en el refrigerador. Si se forma condensación sobre los portaobjetos cuando se los saca del refrigerador o se los aleja del paquete de hielo, las gotitas de agua pueden destruir las células sobre los portaobjetos hechos previamente. Por último, si las muestras se dejan afuera para que las retire el mensajero después de que la clínica haya cerrado, tenga en cuenta cualquier condición climática extrema (por ej., una ola de calor o un frente de frío) que pueda comprometer su estado. Si surgen dudas acerca de la mejor manera de preparar las muestras para el viaje, consulte con un representante de servicio al cliente en el laboratorio de referencia por detalles específicos.