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Muestras para bacteriología

Para confirmar el diagnóstico clínico de las enfermedades infecciosas, se requiere identificar al agente causal por medio de un cultivo bacteriano. Por este motivo, la forma de tomar y remitir las muestras debe ser el apropiado.

27 de Junio de 2011: Por Jorge Hugo Martínez

Usos

Para confirmar el diagnóstico clínico de las enfermedades infecciosas, se requiere identificar al agente causal por medio de un cultivo bacteriano. Por este motivo, la forma de tomar y remitir las muestras debe ser el apropiado.

Datos

Las muestras para el laboratorio bacteriológico deben acompañarse con los datos clínicos y epidemiológicos, indicando si se realizó algún tratamiento previo con antibióticos y si se sospecha de una zoonosis.

Generalidades

Conviene tomar las muestras antes de iniciar un tratamiento antibiótico. Si éste ya se ha iniciado, es conveniente obtener las muestras antes de la administración del antimicrobiano, o 48 horas después de finalizado el tratamiento.

Siempre hay que prevenir la contaminación de la muestra mediante el empleo de técnicas asépticas, y evitando el contacto con desinfectantes.

Recipientes

Los más prácticos son los recipientes estériles de material plástico con tapa a rosca que se adquieren en las farmacias, los cuales poseen distintas capacidades.

También se pueden utilizar recipientes de vidrio con boca ancha y tapa a rosca los que, una vez limpios y enjuagados con agua destilada, se esterilizan en autoclave a 121º C durante 20 minutos. En forma casera, se pueden esterilizar en una olla a presión, o envueltos en papel en el horno de la cocina a 160- 180º C, hasta que el papel tome un color caramelo.

Instrumental

El instrumental debe esterilizarse en autoclave oen olla a presión. También puede hervirse en agua durante 30 minutos, o sumergirse en alcohol y flamearlo antes de usarlo. no deben usarse antisépticos, ya que afectarían a los microorganismos.

Toma de muestras

Líquidos

Se aspiran directamente con jeringa y aguja estériles. Si se quiere utilizar un anticoagulante es preferible la heparina, ya que el EDTA es tóxico para las bacterias. Si no puede recolectarse con jeringa, se pueden usar hisopos estériles.

Secreciones

Se utiliza un hisopo estéril, sumergiéndolo luego en un medio de transporte o en solución fisiológica estéril.

Órganos

Utilizando una técnica aséptica y al abrigo de la llama, se obtienen trozos de 3 a 5 cm de lado y se colocan en un recipiente estéril. Puede agregarse solución fisiológica estéril o glicerina amortiguada estéril. Si se trata de un trozo de intestino, se atan sus extremos y se lo coloca en un recipiente estéril.

Absceso

Luego de la tricotomía, se limpia la piel con agua y jabón, se seca y se desinfecta con alcohol al 70% o yodopovidona. Con jeringa y aguja estériles se aspira el material purulento y se coloca en un tubo estéril. Puede utilizarse un medio de transporte.

Orina

El método de elección es la cistocentesis que se realiza mediante técnicas asépticas, con el animal de pie o en decúbito lateral.

Si se utiliza una sonda uretral estéril, la zona genital debe lavarse previamente con agua y jabón, se enjuaga con agua o solución fisiológica estéril, y se seca con gasa estéril. En ambos casos se envía la muestra en un recipiente estéril.

Se considera infección cuando el recuento es mayor a 1000 UFC/ml (unidades formadoras de colonias/ ml) en las muestras obtenidas por cistocentesis; mayor a 10.000 en las muestras recolectadas por sondaje; y mayor a 100.000 en la micción espontánea.

Generalmente, el aislamiento de tres o más especies bacterianas indica que la muestra se ha contaminado por una recolección inadecuada o una demora en la siembra.

Materia fecal

Se lava la zona anal con agua y jabón, se enjuaga y se seca con gasa estéril. Con un bajalenguas o espátula estéril se toma una muestra de heces del recto.

También puede separarse una porción de materia fecal con instrumental estéril y se toma una muestra que no haya estado en contacto con el medio externo.

Se envía en recipiente estéril.

Hisopado rectal

Una vez realizada la limpieza de la zona, se coloca un hisopo estéril en el ano, se rota y se mantiene durante 30 segundos. Conviene enviar dos hisopos en sendos medios de transporte para gérmenes aerobios y para anaerobios.

Sangre

Se utilizan frascos para hemocultivo. Se realiza la tricotomía y antisepsia de la piel y se extrae sangre. Se desinfecta el tapón de goma del frasco, y se introducen 5 ml de sangre (si es un frasco pediátrico de 20 ml) o 1 a 2 ml (si es un frasco neonatal de 10 ml). Se homogeniza con el medio de cultivo inclinándolo suavemente 2 o 3 veces. no se refrigera.

Envío al laboratorio

Se deben enviar las muestras lo antes posible en conservadoras de poliestireno expandido (Telgopor®) con refrigerantes que mantengan una temperatura de entre 4 y 8º C.

Si el laboratorio está distante, conviene avisar del envío previamente. También se debe tener en cuenta si es víspera de fin de semana o feriado, ya que a veces se demora la siembra por falta de personal.

Medios de transporte

Son medios semisólidos en tubo con base de agar, con el agregado de amortiguadores de pH y pocos nutrientes, lo que posibilita la conservación de los microorganismos por varias horas a temperatura ambiente, y evita el crecimiento exagerado de la flora acompañante. Por lo general, vencen a los 2 años y medio de preparados.

Los medios más usados son el Stuart, el Cary Blair (sobre todo para gérmenes fecales y anaerobios) y el Amies.